Los resultados obtenidos permiten concluir que mediante el uso simult�neo del cultivo fecal y la prueba de ELISA es posible detectar un mayor n�mero de animales infectados, disminuyendo el tiempo necesario para controlar y erradicar la enfermedad. Adem�s, debido a la baja sensibilidad y especificidad, el examen microscópico directo de fecas (tinción de Ziehl Neelsen) no deber�a usarse como m�todo de diagnóstico de Paratuberculosis en animales asintom�ticos. La prueba de ELISA utilizada en este estudio demostró ser eficaz en el diagnóstico de la Paratuberculosis bovina al detectar 20 (8.0%) animales reaccionantes positivos (Cuadro 7), sin embargo, como era de esperar, el cultivo fecal fue notoriamente superior a esta prueba serológica ya que detectó el doble (16.0%) de animales positivos a la enfermedad (Cuadro 1).
RESULTADOS
La diferencia encontrada entre el cultivo fecal y el ELISA concuerda con Whitlock y col. (2000), quienes manifiestan que al utilizar simult�neamente, en reba�os infectados, el cultivo fecal y la prueba de ELISA para el diagnóstico de la Paratuberculosis bovina, generalmente el cultivo fecal detecta m�s del doble de animales positivos. El an�lisis de los resultados bacteriológicos, seg�n grupos de edad, demostró que el mayor porcentaje de cultivos positivos (22.3%) se obtuvo en animales entre 3-5 partos (Cuadro 2). Esto tambi�n queda de manifiesto al analizar la distribución por reba�o de los 40 animales positivos, ya que en el 50% de los reba�os con animales infectados hubo mayor n�mero de muestras positivas al cultivo en animales de 3-5 partos (Cuadro 3). Cuando Joslin había tratado 1.000 pacientes con su dietallegó a la conclusión de que su tratamiento era mejor que otrasalternativas. En 1916, publicó “El Tratamiento de la DiabetesMellitus” donde puntualiza sus experiencias y define nuevosestándares en la práctica de la especialidad. En su libro informóque “la mortalidad de los pacientes fue aproximadamente20 por ciento inferior a la del año anterior, debido a la introducciónde ayuno y el énfasis en el ejercicio regular”.
Bicicletero Colgante
Este mantenido interés, su visión sobre la forma de tratar dicha enfermedad, y su particular dedicación y preocupación por los pacientes aquejados de ella son rasgos relevantes de su personalidad. Toda persona que empiece hoy a trabajar en el campo de la diabetes, más temprano que tarde, se encontrará con la figura descollante de EPJ, producto señero de su tiempo y su entorno familiar. Un mes más tarde, después de un día completo de actividad, de asistir a la Iglesia por la mañana, y alternar con pacientes y amigos, EJP murió en su sueño a los 93 años de edad, el 29 de Enero de 1962. Su huella es tan profunda que quienquiera que desee conocer la diabetes mellitus deberá seguir sus pasos. En 10 (71.4%) de los 14 reba�os y en 40 (16.0%) de las 250 muestras se aisló Mycobacterium de las fecas, confirm�ndose en todas ellas la identidad del agente etiológico por PCR; el porcentaje de animales Map positivos por reba�o fluctuó entre 5.0 % y 66.7 % (Cuadro 1). La detección de anticuerpos s�ricos contra Map se realizó mediante la t�cnica de inmunoenzimo ensayo (ELISA), empleando un kit comercial (IDEXX Laboratories, Inc., USA), de acuerdo al procedimiento descrito por Jark y col. (1997), utilizando un lector fotom�trico a 620 nm.
Elliot Proctor Joslin (1869-
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En 1895, posterior a su graduación en Harvard, EPJ se embarcó en la “gira del continente” que constituía un requisito para los jóvenes estadounidenses licenciados en medicina. En el curso de ella visitó las principales clínicas médicas de Berlín, Freiberg y Viena, volviendo a los Estados Unidos en donde estuvo un año en una pasantía en el Massachusetts General Hospital. Durante esta gira europea contactó a los principales investigadores en metabolismo de Alemania y Austria; esta experiencia, más el año de estadía en el “General”, consolidaron definitivamente su interés por la diabetes mellitus. En 1898 inicia su práctica médica privada en casa de sus padres, 517 Beacon St., Boston, y pocos años más tarde, en 1905, se traslada a vivir y trabajar en 81 Bay State Road. Elliot Proctor Joslin, más a menudo llamado “EPJ”, es considerado un pionero en el campo de la diabetes mellitus. Mostró una temprana dedicación a la diabetes mellitus, enfermedad poco conocida en el siglo 19 y para la cual no existía curación.
de Paratuberculosis bovina en reba�os lecheros infectados
Un generoso regalo del filántropo George F. Baker permitió a Joslin diversificar su trabajo en las complicaciones emergentes de la diabetes como enfermedad vascular periférica, enfermedad renal, neuropatía y retinopatía proliferativa. Esta última complicación, fue el foco de los estudios realizados por el Dr. William Beecham, oftalmólogo del grupo de EJP, que demostró que la ceguera se puede prevenir con aplicación de láser en la etapa de retinopatía proliferativa temprana. Priscilla White, pionera en los estudios de diabetes y embarazo y autora de la Clasificación de White para Diabetes y Embarazo. En 1940, se desarrolla, bajo la dirección de Joslin, el primer sistema de vigilancia de glucosa en sangre antes de las comidas para pacientes hospitalizados, siendo precursor de los modernos equipos de monitoreo de glicemia. En los años 50, su equipo participa en la evaluación de fármacos orales para el control de la diabetes. De los 10 reba�os en que se encontraron animales positivos (ya sea al cultivo fecal o a la prueba de ELISA), en 7 hubo animales positivos a las dos pruebas simult�neamente, coincidiendo plenamente, ambas pruebas, en que los predios 8, 9, 10 y 13 son los m�s infectados (Cuadro 6).
- Las muestras de sangre se obtuvieron por punción de la vena cox�gea en tubos venojet est�riles en cantidad aproximada de 5 ml por animal, las cuales fueron transportadas al laboratorio y, despu�s de separar el suero, congeladas a -20°C hasta su procesamiento.
- Entrenó a enfermeras para supervisarel exigente y riguroso programa de dieta, medir los niveles deglucosa y proteínas en la orina, registrar el peso corporal, yestimular a los pacientes a hacer ejercicio.
- La educación fue privilegiada por EJP en su prácticaprofesional, lo que llevó a decir frases como “La educaciónno es una parte del tratamiento de la diabetes, es el tratamiento”y “El diabético que más sabe, es el que más vive”.
- En su libro informóque “la mortalidad de los pacientes fue aproximadamente20 por ciento inferior a la del año anterior, debido a la introducciónde ayuno y el énfasis en el ejercicio regular”.
- Mostró una temprana dedicación a la diabetes mellitus, enfermedad poco conocida en el siglo 19 y para la cual no existía curación.
En 1935, publicaba “Los objetivos de un tratamiento adecuado para la diabetes para que no se desarrollen complicaciones deben incluir un importante esfuerzo por conseguir niveles de glucemia lo más parecidos posible a la de los sujetos sanos”. Esto fue discutido por décadas por endocrinólogos y científicos, y hasta la Asociación Americana de Diabetes estuvo dividida al respecto. El planteamiento de Joslin no fue validado hasta 30 años después de su muerte, cuando en 1993, se publicaron en el New England Journal of Medicine los resultados del estudio “Control y Complicaciones de la Diabetes (DCCT)” que demostró que el inicio de las complicaciones de la diabetes se retrasa con un estricto control de la glicemia.
De niño ocupaba sus horas libres en la fábrica de su familia ganando hasta 6 centavos de dólar por colocar cordones a 60 pares de zapatos. Todas sus ganancias, a instancias de su padre, las ahorraba en el banco, donde permanecen hasta el día de hoy. Creció impregnado de las enseñanzas cristianas adquiridas en la Evangelical Congregational Church.
Dr. Ricardo Fadic R.
Así se iniciaron lasque posteriormente pasaron a llamarse “las enfermeras de ladiabetes”. La educación fue privilegiada por EJP en su prácticaprofesional, lo que llevó a decir Guía de multiplicadores de hasta x500 en cada tirada frases como “La educaciónno es una parte del tratamiento de la diabetes, es el tratamiento”y “El diabético que más sabe, es el que más vive”. En cada reba�o se recolectó simult�neamente una muestra de fecas y una muestra de sangre de un n�mero representativo de animales asintom�ticos (aproximadamente %), hasta completar un total de 250; adem�s, se anotó el n�mero de partos de cada uno de los animales muestreados en base a los registros disponibles en el predio. Las muestras fecales se obtuvieron por v�a rectal mediante una manga de palpación rectal limpia y seca y fueron transportadas inmediatamente al laboratorio para su procesamiento dentro de 96 h (Whipple y col., 1991). Las muestras de sangre se obtuvieron por punción de la vena cox�gea en tubos venojet est�riles en cantidad aproximada de 5 ml por animal, las cuales fueron transportadas al laboratorio y, despu�s de separar el suero, congeladas a -20°C hasta su procesamiento. El Dr. Joslin mantuvo siempre la posición que el buen control de la glucosa, alcanzado con dieta, ejercicio, y un ajuste de la insulina según frecuentes controles de glucosa, prevendría complicaciones.
Paratuberculosis (Green y col., 1986), utilizando los partidores espec�ficos P90+ (5′-GAAGGGTGTTCGGGGCCGTCGCTTAGG-3′) y P91+ madison med (5′-GGCGTTGAGGTCGATCGCCCACGTGAC-3′). Dos años más tarde escribió el “Manual diabético – parael médico y el paciente”, reflejando el compromiso de Joslincon sus pacientes aportándoles el conocimiento que les permitieraautomanejar su enfermedad. Hoy secuentan 14 ediciones y se sigue publicando por el Centro deDiabetes Joslin bajo el título “Manual Joslin para la Diabetes”. Realizó residencia en ciencias básicas (neurobiología) en la misma casa de estudios.
